Согласно ГФ РФ тест на пирогенность проводится биологическим методом на кроликах, основанным на измерении температуры тела животных после внутривенного введения испытуемого препарата. С помощью испытания на животных возможно определять действие обоих классов пирогенов - «экзо» и «эндо» - токсинов, а также пирогенов небактериальной природы.

Реактивы и материалы:

• весы настольные АD-10
• автоматический испытатель пирогенности АРТ-75.

Реактивы и материалы:

• ЛАЛ-реактив Perotel 5,0 мл/флакон
• Контрольный стандарт эндотоксина 0,5 мкг/флакон
• Вода для ЛАЛ-теста
• Пробирки для приготовления разведений
• Наконечники на 200 и 1000 мкл
• пипетки одноканальные
• весы лабораторные электронные
• термостат твердотельный THERMOLYNE DB-17610-26
• вихревая мешалка типа «Вортекс»
• секундомер

- гель-тромб тест/количественный анализ (метод В). Этим методом определяют содержание бактериальных эндотоксинов с помощью ряда последовательных разведений испытуемого лекарственного средства.
Реактивы и материалы:

• ЛАЛ-реактив Perotel 5,0 мл/флакон
• Контрольный стандарт эндотоксина 0,5 мкг/флакон
• Вода для ЛАЛ-теста
• Пробирки для приготовления разведений
• Наконечники на 200 и 1000 мкл
• пипетки одноканальные
• весы лабораторные электронные
• термостат твердотельный THERMOLYNE DB-17610-26
• вихревая мешалка типа «Вортекс»
• секундомер

- кинетический турбидиметрический метод (метод С). Требуется наличие специального оборудования и программного обеспечения. Основан на определении скорости развития мутности реакционной смеси, измеряемой по времени, необходимому для достижения заданной величины оптической плотности. Испытуемый образец в выбранном разведении смешивают с ЛАЛ-реактивом помещают в пробирочный ридер. Измерение оптической плотности реакционных смесей проводится автоматически через равные промежутки времени при длине волны 660 нм. В присутствии эндотоксинов в пробирках наблюдается помутнение реакционной смеси. Скорость этого помутнения прямо пропорциональна содержанию эндотоксинов в образце. Концентрация эндотоксинов в испытуемом образце рассчитывается с помощью стандартной калибровочной кривой.

Реактивы и материалы:

• ЛАЛ-реактив Perotel-Т 5,0 мл/флакон
• Контрольный стандарт эндотоксина 0,5 мкг/флакон
• Вода для ЛАЛ-теста
• Пробирки для приготовления разведений
• Наконечники на 200 и 1000 мкл
• пипетки одноканальные
• весы лабораторные электронные
• вихревая мешалка типа «Вортекс»
• пробирочный ридер «Pyros Kinetix Flex» с программным обеспечением Pyros EQS.
• секундомер

Основной целью проведения теста на аномальную токсичность является выявление токсичности препарата, превышающей установленный ранее допустимый уровень, контролируемый по повышению летальности или по неожидаемым (нерегламентированным) явлениям интоксикации животных. Данное испытание позволяет определить аномальную (повышенную) токсичность лекарственного препарата, которая может возникнуть за счет появления продуктов разложения или нежелательных примесей при изменении процесса производства, не предусмотренных регламентом производства, транспортирования или хранения. Испытание на аномальную (повышенную) токсичность лекарственных средств с использованием животных в качестве тест-объекта позволяет выявить любые, даже неожиданные примеси вне зависимости от их природы, тем самым повышая безопасность ЛС.

Это один из методов определения безопасности лекарственных препаратов. Контроль испытуемого препарата по показателю «Безвредность» является обязательным отработке новых технологий производства лекарственного средства, при предварительном и сертификационном контроле, при оценке качества и проверке стабильности лекарственных форм в процессе установления срока годности. Целью проведения теста на безвредность является выявление негативного воздействия испытуемого препарата на организм животного, при вероятном образовании токсических примесей (например, при нарушении производственного регламента, нарушениях условий хранения и т.п.).